Abstract :
Salmonella enterica and Escherichia coli use the inner membrane transporter DctA to import the pyrimidine biosynthetic pathway intermediate orotate from the environment. To study the regulation of dctA expression, we used an S. enterica serovar Typhimurium pyrimidine auxotroph to select a mutant that could grow in an otherwise nonpermissive culture medium containing glucose and a low concentration of orotate. Whole genome sequencing revealed a point mutation upstream of dctA in the putative cyclic AMP receptor protein (CRP) binding site. The C[right arrow]T transition converted the least favourable base to the most favourable base for CRP-DNA affinity. A dctA::lux transcriptional fusion confirmed that the mutant dctA promoter gained responsiveness to CRP even in the presence of glucose. Moreover, dctA expression was higher in the mutant than the wild type in the presence of alternative carbon sources that activate CRP. Key words: orotate, dctA, cAMP receptor protein, CRP, Salmonella Salmonella enterica et Escherichia coli utilisent le transporteur DctA de la membrane interne pour importer de l'environnement l'orotate, un intermediaire de la voie de biosynthese des pyrimidines. Pour etudier la regulation de l'expression de dctA, les auteurs ont utilise un auxotrophe pour les pyrimidines de S. enterica serovar Typhimurium pour selectionner un mutant qui pouvait se developper dans un milieu de culture autrement non permissif contenant du glucose et une faible concentration d'orotate. Le sequencage du genome entier a revele une mutation ponctuelle en amont de dctA dans le site de liaison putatif de la proteine receptrice de l'AMP cyclique (CRP). La transition C[right arrow]T a converti la base la moins favorable en base la plus favorable en ce qui a trait a l'affinite CRP-ADN. Une fusion transcriptionnelle dctA::lux a confirme que le promoteur mutant dctA a gagne en faculte de reponse envers la CRP meme en presence de glucose. De plus, l'expression de dctA etait plus elevee chez le mutant que chez le type sauvage en presence de sources de carbone alternatives qui activent la CRP. [Traduit par la Redaction] Mots-cles : orotate, dctA, proteine receptrice de l'AMPc, CRP, Salmonella